Tokyo, Japan





Industrial Plant

　　进入游戏，本关类似于一般游戏的教学关卡，开始会给玩家一些必要的操作提示。根据初始的操作提示消灭第一波敌人,之后会降下一块踏板使玩家可以继续前进,在紧闭的门前再次遇到敌人，运用身边的道具作为武器来投掷他们，全灭杂兵后大门打开。穿过大门，在道路尽头发现另一群杂兵。
继续前进来到控制台前，玩家需要控制自己的人物踏上一边的踏板，队友会自动上到另一边的踏板。由此先后打开两条通路，一条通向DNA，另一条可以让玩家继续游戏。之后玩家会遇到两个体型巨大的对手，游戏会提示使用旁边写有“危险”字样的红色箱子投掷它们。消灭他们之后，出现一群杂兵，全灭后前进的大门开启。

　　系统在这时会提示玩家如何去切换角色，消灭敌人后会降下通向DNA的踏板，在踏板附近出现3个之前遇到的大型敌人，用蜘蛛侠的蜘蛛丝把他们拉倒在地同时进行攻击，之后站在踏板上激活另一条通路。来到环状平台处，平台的右方是控制台，站在上面激活升降机（穿过中央的洞），跳上去得到第3个DNA，之后通过通道准备迎接第一场BOSS战。

　　游戏的第一个BOSS并不是很强，玩家会在之后的机关多次遇到它，它的主要技能是放出波浪状激光以及一些飞行的机器人，玩家可以在躲避波浪的同时用周围的箱子来攻击BOSS，或者抓住这些机器人来攻击它。BOSS战败后大门打开，遇到一批杂兵，打败他们后直接向前走拿到秘密区域钥匙。消灭这个区域的敌人后会解开一块对战场地。脱出后走上斜坡，在进入屋子前拿到两过道中央的DNA，全灭屋中敌人后本关结束，之后出现过场动画。

　　回到最初的地方，Black Cat成为可选择人物。

Secret Lab

　　进入本关后，眼前就有一个DNA免费到手，不过拿到前，会有一堆杂兵出现，不废话了，继续使用蜘蛛丝招呼他们。前进后在一间灯光很亮屋子里发生另一场杂兵战，结束后不要忘了在离开之前破坏大门左侧的正方形物体得到第2个DNA，之后在下一个屋中的圆柱体顶端找到最后一个DNA。并前进到最后一个房间找到Dr. Octopus引发Boss战。

　　在Dr. Octopus身前有2个发电机，用滑行在轨道上的箱子去破坏，每3次攻击发电机后Dr. Octopus会下来修理它们，不过在这之前，先要防止自己手中用作攻击的箱子被激光破坏，同时这些激光还会攻击蜘蛛侠本人，不过它们对角色的伤害几乎可以忽略不计，在Dr. Octopus跳到地上修理发电机的时候就是玩家修理它的时候了，一般第一次过去攻击会被Dr. Octopus用手臂弹开，站起来后继续攻击它，直到他修理好发电机重新回到位置上，依照之前的流程反复攻击Dr. Octopus，直到他的生命值降为0，之后Dr. Octopus加入队伍。

The Rooftops

　　向左走沿阶梯向下，之后在房顶上遇到几个大型杂兵，消灭他们之后跳到另一个相邻的房顶上，在斜坡底部得到密道钥匙。然后反方向向上走，跳到另一个更高的房顶得到DNA。打败另一群杂兵并开启一扇门。经过两场战斗后玩家可以看到远处有一扇紧闭的门并同时显示一个不知道用途的装置。这时玩家需要跳上屏幕上方的屋顶，并通过金属箱子跳跃到屋顶的上面。向左走用之前得到的钥匙打开密道，消灭里面的敌人后解开另一块对战场地。脱出后继续向右前进得到一个DNA，之后到达刚才所说的装置那里，游戏会提示这时一个产生杂兵的装置，破坏它的话杂兵就不会出现了。用跳动攻击可以使玩家避开杂兵的骚扰专心于破坏机器，至于那些杂兵就交给你的队友对付吧。

　　穿过大门，接连发生两场杂兵战，全灭敌人后站到地板按钮的上方，按下去以后会激活一座桥通向另一个DNA。拿到DNA后跳到台阶上，杂兵出现。再次前进到达以蓝色气球为背景的屋顶，然后在斜坡底部的右下角角落里，发现本关隐藏的DNA。之后遇到第一关遇到的那个BOSS，用与之前同样的方法解决它。解决后穿过大门站在屋子中央的开门按钮上，本关结束。

Oscorp Japan

　　先解决几个杂兵，之后大门打开继续杂兵战，消灭他们然后沿楼梯向上，期间进行一场战斗，之后再次遇到之前的boss。解决后跳上左侧的平台上得到DNA，并消灭一些杂兵。进入大门，穿越上方的岔道之后向左走，你会发现一个隐藏的DNA。然后站在地板的按钮上打开大门去迎战本关的最终BOSS。

　　本关的BOSS是Green Goblin，他会站在远处向你发射跟踪导弹和一种黄色球体，该种球体隔一段时间就会爆炸给玩家造成伤害。此战及其简单，抓住还未爆炸的黄色球体跳起向BOSS投掷即可，至于跟踪导弹也可以连续跳跃来混淆它的攻击方向，最终Green Goblin战败加入队伍。